目的利用结直肠癌（CRC）耐药细胞株［HCT8/紫杉醇（PTX）、HCT8/长春新碱（VCR）］构建稳定敲低B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）基因的转基因细胞系，分析Bcl-2抑制剂AT101、obatoclax及Bcl-2蛋白下调对细胞PTX、VCR耐药的影响。方法通过Western blot检测CRC耐药细胞系和亲本细胞系中激酶、细胞凋亡、自噬相关蛋白表达水平及稳定敲低Bcl-2基因的耐药细胞系中Bcl-2表达水平；采用噻唑蓝（MTT）法、克隆形成实验、EdU染色实验测定PTX、VCR对野生型结直肠癌细胞HCT8、耐PTX细胞HCT8/PTX及耐VCR细胞HCT8/VCR、稳定敲低Bcl-2基因的转基因耐药细胞系的增殖能力。结果HCT8/PTX、HCT8/VCR细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显高于HCT8细胞，PTX、VCR或Bcl-2抑制剂单一处理与共处理均可促使耐药细胞增殖活力下降，而且敲减或药理性抑制Bcl-2蛋白表达可有效逆转结直肠癌细胞的耐药表型。结论抗凋亡蛋白Bcl-2在HCT8/PTX和HCT8/VCR细胞中高表达是引起细胞产生耐药的原因。