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搭载BMP-2多肽的生物矿化胶原凝胶促进BMSCs成骨分化的研究
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    目的基于纳米羟基磷灰石(nHA)和胶原蛋白合成生物矿化胶原凝胶支架,并搭载骨形态发生蛋白-2(BMP-2)多肽,探究其缓释功能及对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化。方法将BMSCs细胞、雄性SD大鼠、新西兰大耳白兔根据其干预材料分为空白组(不作生物矿化胶原凝胶干预)、对照组(使用不搭载BMP-2的生物矿化胶原凝胶干预)和实验组(使用搭载BMP-2的生物矿化胶原凝胶干预)。制备搭载BMP-2多肽的生物矿化胶原凝胶。利用雌性新西兰乳兔提取兔BMSCs,将BMSCs与生物矿化胶原凝胶共培养并分组,采用电子扫描显微镜观察各组BMSCs表征;将生物矿化胶原凝胶注射至大鼠背部皮下两侧并分组,观察各组大鼠皮下凝胶降解情况及皮肤炎症情况。CCK-8法检测各组BMSCs增殖情况,碱性磷酸酶(ALP)显色试剂盒定性和定量分析各组BMSCs ALP活性,分别在共培养1、3 d后进行活细胞/死细胞免疫荧光染色。茜素红染色评价各组BMSCs钙结节矿化情况,qPCR检测各组BMSCs成骨相关基因RUNX2、OCN的mRNA表达水平,免疫荧光染色检测各组BMSCs RUNX2、OCN的蛋白表达水平。采用雄性新西兰大耳白兔建立体内桡骨临界骨缺损模型,按分组植入相应生物矿化胶原,Micro-CT检测大耳白兔桡骨骨再生情况,获取骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)数据并作比较;HE染色、Masson染色评估各组兔桡骨新生骨结构、材料残留、炎症反应及胶原纤维成熟度。结果体外实验中,CCK-8法结果表明,在共培养第7天,与空白组比较,对照组和实验组BMSCs细胞增殖率明显升高(P<0.01)。与空白组比较,实验组和对照组ALP活性明显升高(P<0.001),且实验组高于对照组(P<0.001)。茜素红染色结果显示,与空白组比较,实验组及对照组的钙结节明显增多(P<0.001),且实验组多于对照组(P<0.01)。qPCR结果显示,实验组OCN、RUNX2 mRNA表达水平较对照组和空白组明显升高,免疫荧光染色结果显示相同的趋势。体内实验中,HE及Masson染色结果显示,实验组的体内成骨性能明显高于空白组和对照组(P<0.001)。实验组BV/TV、Tb.Th明显高于空白组和对照组(P<0.001)。结论搭载BMP-2多肽的生物矿化胶原凝胶能够在体外促进BMSCs的增殖,同时促进BMSCs的成骨分化。

    Abstract:

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引用本文

刘邦定 ,唐永亮 ,李妮 ,任波 △.搭载BMP-2多肽的生物矿化胶原凝胶促进BMSCs成骨分化的研究[J].重庆医学,2025,54(12):2782-2791

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  • 在线发布日期: 2026-01-06
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