目的利用小干扰RNA（siRNA）沉默大鼠骨骼肌成肌细胞L6甘氨酰-转运RNA合成酶（GlyRS），探讨GlyRS对L6细胞肌球蛋白重链Ⅱb(MHC-Ⅱb)表达的影响。方法设计并合成3条GlyRS-siRNA序列（GlyRS-siRNA1、2、3），分别转染L6细胞，qPCR检测GlyRS mRNA表达，筛选干扰效率最高的GlyRS-siRNA序列。另取L6细胞，随机分为正常细胞组（不做任何处理，N组）、阴性对照组（转染阴性对照序列，NC组）及GlyRS-siRNA-24 h组、GlyRS-siRNA-48 h组、GlyRS-siRNA-72 h组、GlyRS-siRNA-96 h组和GlyRS-siRNA-120 h组（转染干扰效率最高的GlyRS-siRNA序列并培养相应时间），分别在相应的时间点测量各组L6细胞平均直径，qPCR和Western blot分别检测GlyRS、MHC-Ⅱb的mRNA和蛋白表达情况。结果GlyRS-siRNA1、2、3分别使GlyRS mRNA表达水平下降了90.4%、62.0%和78.7%，其中，GlyRS-siRNA1干扰效率最高（P<0.001）；GlyRS-siRNA1转染L6细胞24 h，细胞平均直径较NC组无明显变化，转染48 h和72 h，L6细胞平均直径较NC组明显减小（P<0.001），之后又逐渐增大；GlyRS-siRNA各时间点组GlyRS mRNA表达水平较NC组均降低(P<0.05,P<0.01)，其中以GlyRS-siRNA-72 h组降低最明显；GlyRS-siRNA-各时间点组MHC-Ⅱb mRNA表达水平均较NC组升高(P<0.05,P<0.01)，其中以GlyRS-siRNA-48 h、-72 h、-96 h组升高较为明显，但3组组间两两比较差异无统计学意义（P>0.05）；GlyRS和MHC-Ⅱb的蛋白表达水平变化情况与其mRNA表达基本一致。结论沉默GlyRS表达能上调L6细胞MHC-Ⅱb合成。