2022年安徽省重点研究与开发计划项目(2022e07020064)
目的优化血小板的富集方法,分析富血小板血浆(PRP)激活前后关键分子的浓度变化及其激活产物对大鼠内皮祖细胞增殖的影响。方法采用试管两次离心法优化血小板的富集,并检测富集后PRP的血小板计数;ELISA检测PRP激活前后血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)和P-选择素(CD62P)浓度变化;采用液氮冻融法激活PRP,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PRP激活产物对大鼠内皮祖细胞增殖的影响。结果两次离心法可以获得的血小板最佳富集系数为4.63;低速长时两次离心富集后,白膜上层区域血小板计数最高。机采血小板计数为500×10 9/L的PRP激活前后,VEGF浓度分别为(3 418.12±488.80)、(4 530.04±308.30)pg/mL,ES浓度分别为(6 168.98±253.22)、(6 594.65±82.47)pg/mL;CD62P浓度分别为(6 678.23±324.15)、(17 630.53±746.24)pg/mL,激活前后比较差异有统计学意义(P<0.01)。用内皮祖细胞专用培养基梯度稀释激活后的PRP,MTT法检测结果表明:基础培养基培养48 h时其促进内皮祖细胞增殖的最佳体积分数为0.25%;完全培养基中培养24 h时其促进内皮祖细胞增殖的最佳体积分数为0.062 5%,48 h时为0.125%。结论优化富集的PRP激活前后VEGF、ES和CD62P浓度发生明显变化;在基础培养基中其促进内皮祖细胞增殖的最佳体积分数为0.25%。
肖家军 ,赵越 ,柏璐 ,许程 ,左金华 ,胡亚辉 ,夏凯 ,汪碧澄 ,谢晓彤 ,唐香香 .血小板分离优化及其激活产物对内皮祖细胞增殖的影响[J].重庆医学,2025,54(10):2269-2274