目的探讨臭氧水穴位注射联合腔内冲洗对膝骨性关节炎（KOA）患者疼痛及相关因子的影响。方法选取2023年6-12月河南中医药大学第三附属医院收治的64例老年KOA患者为研究对象，采用随机数字表法分为观察组和对照组，每组32例。对照组采用臭氧水穴位注射，观察组在对照组基础上联合臭氧水腔内冲洗，每周治疗1次，连续治疗4周。比较两组治疗前后视觉模拟量表（VAS) 评分、Lysholm膝关节功能评分、临床疗效，以及关节液前列腺素E2（PGE2）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6水平。结果两组治疗后VAS评分、Lysholm膝关节功能评分、PGE2、IL-1β及IL-6水平较治疗前均有明显改善（P＜0.05），且观察组较对照组改善更明显（P＜0.05）。多重线性回归分析显示，治疗前VAS评分与PGE2水平有关 (P＜0.05),与年龄、IL-6、IL-1β水平无关(P＜0.05)。观察组总优良率明显高于对照组(P＜0.05),两组患者在治疗过程中均未出现晕针、注射部位皮肤感染、症状加重、关节不适等不良反应。结论臭氧水穴位注射联合腔内冲洗治疗KOA的临床疗效较好，可能是通过调控致痛因子和炎症因子水平改善疼痛症状。